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技術服務
technical serviceWB-蛋白質免疫印跡法(Western Blot)檢測服務
蛋白質免疫印跡法 (Western Blot ) ,簡稱WB ,是指通過SDS-PAGE膠將不同分子量的蛋白質分離開,然后將目標蛋白轉移到載體(PVDF)膜上,利用抗原抗體的特異性結合,用特異性的一抗結合目標蛋白,用HRP標記的二抗結合一抗,再加以ECL發光液顯色,檢測組織或者細胞內某種或者某些特異性蛋白質的表達。蛋白質免疫印跡是做蛋白質分析的一種常規技術,常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析,還可以用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。
實驗原理
免疫印跡法原理:將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。免疫印跡法是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術,免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。
我們的優勢
1. 技術人員操作經驗豐富,實驗結果有保障
2. 細胞庫豐富,擁有人、小鼠、大鼠、兔、猴等不同種屬的細胞裂解液
3. 公司強大的產品庫,有高靈敏度、高特異性的WB應用的抗體平臺
實驗流程
實驗周期:1-2周
圖片展示
服務流程
注意事項
1. 新鮮組織,組織>30mg干冰運輸。
2. 細胞量為5*10^6以上,收集細胞沉淀,干冰運輸。
3. 樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品,細菌濕重>1mg等。
4. 建議提供目的蛋白陽性表達樣品(純蛋白、有陽性表達的細胞或組織、商品化的陽性對照產品等)作為陽性對照。
5. 目的蛋白相應一抗:請您提供質量保證的一抗(或委托我公司準備)。抗體的使用量通過預實驗后進行確認,原則上不回收使用一抗。
6. 陽性對照樣品(盡量提供)。
7. 相關文獻(可選)。
注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關材料(具有保密性的材料除外)若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內進行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。

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